معلومة

عثة الفاكهة الشرقية أشجار الخوخ تامو

عثة الفاكهة الشرقية أشجار الخوخ تامو


عثة الفاكهة الشرقية أشجار الخوخ تامو* (Goy) (* Zeiraphera rugulosa *) يمكن أن يؤدي إلى فواكه ذات نشاط أقل وفترة صلاحية منخفضة. أشار عدد من الدراسات إلى أن المكونات المتطايرة الرئيسية للعثة هي التربينويدات ، والتي تتكون من الألدهيدات والكحول والكيتونات والإسترات. ومع ذلك ، فإن مكونات ندى العسل التي تفرز من العثة غير معروفة.

لقد أبلغنا سابقًا أن * فينيل إيزوسيانات * (PEI) ، وهو مركب بيروليدون ، كان أحد المكونات الرئيسية لمنح العسل لهذه العثة ^ [@ CR1] ^. كان لدى PEI نشاطًا قويًا مضادًا للميكروبات وكان مستوى السمية الخلوية فيه أقل ضد خط خلايا الثدييات مقارنة بالمركبات الفينولية ^ [@ CR1] ^. كما درسنا تأثير مكون جزيرة الأمير إدوارد على نمو يرقات عثة الفاكهة الشرقية * Z. rugulosa *. نتيجة لذلك ، خفضت جزيرة الأمير إدوارد بشكل ملحوظ كتلة اليرقات وكتلة العذراء.

ومع ذلك ، لم تقلل جزيرة الأمير إدوارد وحدها من صلاحية يرقات عثة الفاكهة الشرقية. يشير هذا إلى أن المركبات الأخرى ، التي لم يتم تقييمها في هذه الدراسة ، كانت متورطة في تطوير وجدوى يرقات عثة الفاكهة الشرقية.

الطرق {# Sec4}

=======

المواد {# Sec5}

---------

### زراعة بكتيريا B. subtilis {# Sec6}

* Bacillus subtilis * subsp. * تمت تربية * subtilis * KJ50 عند 37 درجة مئوية في وسط LB (SIGMA ، أوساكا ، اليابان) لمدة 14 ساعة. تم حصاد الخلايا بالطرد المركزي عند 9000 × جم لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية ، وغسلها باستخدام محلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪ ثم بالماء المقطر المعقم. تم جمع كريات الخلايا بالطرد المركزي ، وتم تجميدها في النيتروجين السائل والأرض باستخدام ملاط ​​ومدقة. تم تجميد الخلايا ، وسحقها إلى مسحوق ، وتخزينها عند -80 درجة مئوية.

### تحديد الحد الأدنى من تركيز المثبط (MIC) {# Sec7}

تم تعليق البكتيريا المجففة بالتجميد (10 مجم) في 200 ميكرولتر من الماء المقطر المعقم ، وخلطها بقوة ، وحضنت لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية. تم تعديل تعكر المعلق البكتيري إلى قيمة 0.5 من معايير McFarland عن طريق الخلط مع الحجم المناسب من الماء المقطر المعقم. بعد ذلك ، تم تعديل المعلق إلى تركيز نهائي قدره 100 ميكروغرام / مل بالماء المقطر المعقم. تم توزيع المعلق البكتيري (100 ميكرولتر) في كل بئر من صفيحة ميكروية ذات قاع مسطح 96 بئر (Corning ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحضين الصفيحة الدقيقة عند 37 درجة مئوية في حاضنة CO ~ 2 ~ لمدة 24 ساعة. تم تعريف MIC على أنه أقل تركيز للمركب يمنع التعكر في البئر. تم اختبار قيم MIC في ثلاث نسخ.

### تحديد الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC) {# Sec8}

تم نقل الثقافات الموجودة في آبار فحص MIC التي لم تظهر أي نمو على صفيحة أجار LB جديدة وتم تربيتها عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. تم تعريف MBC على أنه أقل تركيز للمركب الذي منع نمو البكتيريا المرئي.

### * في المختبر * اختبار الحساسية لمضادات الميكروبات {# Sec9}

تم تحديد حساسية مضادات الميكروبات للمركبات لمجموعة من الكائنات الحية الدقيقة من خلال طريقة انتشار القرص باستخدام الوسائط المتاحة تجاريًا التالية: أجار مولر-هينتون (MHA) ، أجار الدم ، أجار MacConkey ، وأجار دم الأغنام (Hangzhou Microbial Reagent Co.Ltd. . ، هانغتشو ، الصين). تتكون لوحة الكائنات الحية الدقيقة من * Escherichia coli * (ATCC 35218) ، * Salmonella typhi * (ATCC 9285) ، * Proteus vulgaris * (ATCC 29243) ، * Staphylococcus aureus * (ATCC 25923) ، * Staphylococcus epidermidis * (ATCC 12228) ، * Bacillus subtilis * (ATCC 6633) ، * Bacillus cereus * (ATCC 14579) ، * Enterobacter cloacae * (ATCC 23355) ، * Pseudomonas aeruginosa * (ATCC 27853) ، * Citrobacter freundii * (ATCC 8090) ، * Pseudomonas putida (ATCC 51461) ، * Salmonella paratyphi * (ATCC 9250) ، و * Proteus vulgaris * (ATCC 19119). تم تلقيح لوحة الكائنات الحية الدقيقة على سطح ألواح الآجار وتم تربيتها عند 37 درجة مئوية لمدة 24-48 ساعة. تم تحديد الحد الأدنى من التركيزات المثبطة (MICs) للمركبات المختارة ضد الكائنات الحية الدقيقة المختبرة باستخدام طريقة التخفيف الدقيق وفقًا لإرشادات معهد المعايير السريرية والمخبرية (CLSI) ^ [@ CR24] ^. باختصار ، تم إذابة المركبات في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO ، Sigma ، St. /نحن سوف). بعد الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة ، تم تحديد قيم MIC على أنها أقل تركيز للمركبات المختبرة التي حالت دون تكوين منطقة نمو مرئية.

فحص بيوفيلم {# Sec14}

-------------

تم تقييم قدرة المشتقات 1-arylpyrazol-5-yl-pyridin-2-yl-amine التمثيلية على تثبيط تكوين الأغشية الحيوية باستخدام مقايسة البنفسج البلوري (CV) ^ [@ CR39] ^. باختصار ، تم تلقيح حجم 100 ميكرولتر من المعلق البكتيري الذي يحتوي على 1 × 10 ^ 7 ^ وحدات تشكيل مستعمرة (CFU) لكل مل على ألواح البوليسترين ذات 96 بئر ، ثم تم تحضينها عند 37 درجة مئوية في ظروف ثابتة. تم تحديث وسط المزرعة في اليوم الثالث ، وبعد ذلك ، كل 3 أيام ، تمت إزالة وسط الثقافة ، وتم تلوين الأغشية الحيوية المتبقية بنسبة 0.2٪ CV لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. لتقدير تكوين الأغشية الحيوية ، تم استخلاص السيرة الذاتية المرتبطة بـ 50٪ من الإيثانول ، وتم قياس امتصاص الصبغة عند 570


شاهد الفيديو: طرق التعامل مع سقوط الاوراق والتزهير المبكر فى اشجار الخوخ